Pregătirea ADN genomic pentru genotipare

Reactivul de liză Viagen DirectPCR este un tampon utilizat pentru a liza țesutul animal și a elibera ADN-ul pentru aplicații viitoare, cum ar fi PCR. Promite să conțină inhibitori ai inhibitorilor PCR care se găsesc în țesuturile animale, făcând astfel ADN-ul eliberat compatibil pentru genotiparea ulterioară a PCR. Există câteva opțiuni diferite de compoziție tampon disponibile pentru cumpărare: coadă, ureche, sac de gălbenuș și celule cultivate. Cel mai bun lucru despre acest buffer este ușurința de utilizare și protocolul simplu. Pur și simplu adăugați în jur de 200-250 ul de reactiv și ~ 25 ul proteinază K (20 mg / ml) la proba de coadă. Tubul este incubat la 55 ° C timp de 4-6 ore, amestecarea intermitentă și vortexarea probei sunt utile pentru a asigura liza completă a cozii. Lizatele brute sunt apoi incubate la 85 ° C timp de 45 de minute pentru a inactiva proteinaza K. Pentru genotiparea PCR,

Am folosit acest tampon de mai multe ori. În cea mai mare parte, a funcționat foarte bine. Este mult mai ușor și mai rapid de utilizat decât kiturile DNeasy și mult mai ușor decât să-ți compui propriul tampon de liză de coadă PCR. Cu toate acestea, ADN-ul nu este cu siguranță la fel de pur și concentrat ca atunci când folosiți un kit sau vă creați propriul tampon cu precipitații și spălări ulterioare. Dacă este necesară o puritate mai mare, este posibil să se utilizeze lizatul ADN Viagen și să se adauge NaCI și izopropanol pentru a precipita ADN-ul, urmat de o spălare EtOH 70% ulterioară și reconstituire în 10 mM Tris-HCl.

Viagen Biotech

Numele produsului:

Reactiv de liza DirectPCR (coada mouse-ului)

Număr de catalog:

102-T

Acesta este un sistem cu un singur tub pentru prepararea rapidă a ADN-ului din mai multe specimene, inclusiv coada șoarecelui. Am folosit pentru genotiparea coloniilor de șoareci. Lizatul din acest reactiv este bun pentru genotipare, dar nu este potrivit pentru PCR sensibil.

Detalii

Viagen DirectPCR® DNA Extraction System este un sistem cu un singur tub pentru prepararea rapidă a ADN-ului din cozi de șoareci, urechi, sac de gălbenuș și celule de cultură. Componentele în curs de brevetare dezvoltate de oamenii de știință de la Viagen Biotech Inc. permit ca extractele de ADN rezultate să fie compatibile cu PCR genomică pentru genotipare. Extractele brute de probe biologice nu sunt compatibile cu multe reacții de biologie moleculară, cum ar fi reacția în lanț a polimerazei (PCR), în parte datorită inhibitorilor conținuți în extracte brute. Reactivii DirectPCR nu numai că mediază liza rapidă a probelor biologice, ci conțin și inhibitori care suprimă în mod eficient activitățile inhibitoare ale lizatelor brute pentru amplificarea PCR, menținând în același timp la maximum integritatea ADN-ului genomic eliberat.

Scurtă procedură
1. Lisați cozile în reactivul de liză DirectPCR®.
2. Se incubează 45 min la 85 ° C.
3. Genotiparea PCR cu 1 μl de lizat.

Protocoale detaliate:   coadă, ureche, gălbenuș și celule cultivate.

Sistemul DirectPCR oferă avantaje față de protocoalele convenționale care includ:
· Economie de timp:  mai puțin timp practic . Lizatele de coadă brute pentru PCR.
· Economii de bani:  reacții rentabile.
· Sigur:  fără reactivi organici.
· Mediu:  Mai puține deșeuri (reactivi organici, tuburi, vârfuri etc.)
· Fiabile și eficiente:  Rată de succes practic de 100% cu randamente ridicate.

Reactiv de liza DirectPCR (coada mouse-ului)

101-T 50ml (250 cozi de șoarece).

102-T 100ml (500 cozi de șoarece).

Direct Mouse Genotyping Kit

K1025-500 500 rxns
EUR 189

DIRECTPCR LYSIS REAGENT (TAIL)

101-T 50 ml
EUR 141
Description: Up to 250 tails (50ml)

DIRECTPCR LYSIS REAGENT (TAIL)

102-T 100ml
EUR 207
Description: Up to 500 tails (50ml)

DIRECTPCR LYSIS REAGENT (CELL)

301-C 50 ml
EUR 141
Description: For use with cultured cells

DIRECTPCR LYSIS REAGENT (CELL)

302-C 100 ml
EUR 207
Description: For use with cultured cells

DIRECTPCR LYSIS REAGENT (EAR)

401-E 25 ml
EUR 141
Description: For use with ear pieces

DIRECTPCR LYSIS REAGENT (EAR)

402-E 50 ml
EUR 207
Description: For use with ear pieces

Direct PCR Complete Kit

S700 100 rcs
EUR 133

Direct PCR Complete Kit

S700-2 5x100 rcs
EUR 524

Plant Direct PCR Kit

PD105-01 50 rxn (50 μl/rxn)
EUR 169

Plant Direct PCR Kit

PD105-02 200 rxn (50 μl/rxn)
EUR 354

Xpro IP Cell Lysis Reagent,SDS Free

X3100-010 100ml
EUR 174

Xpro IP Cell Lysis Reagent,SDS Free

X3100-050 500ml
EUR 317

Allele-In-One Human Blood Direct Lysis Buffer

ABP-PP-BD01100 100 RXNS Ask for price

Allele-In-One Human Blood Direct Lysis Buffer

ABP-PP-BD01500 500 RXNS Ask for price

Allele-In-One Mouse Tail Direct Lysis Buffer

ABP-PP-MT01100 100 RXNS Ask for price

Allele-In-One Mouse Tail Direct Lysis Buffer

ABP-PP-MT01500 500 RXNS Ask for price

Blood Direct PCR Kit V2

PD103-01 50 rxn
EUR 169

Blood Direct PCR Kit V2

PD103-02 200 rxn
EUR 354

Direct PCRKits for Blood

FYT302-100P 100 Preps Ask for price

Direct PCRKits for Plant

FYT303-100P 100 Preps Ask for price

Genotyping Kit

K1026-200 200 rxns
EUR 119

Genotyping Kit

K1026-500 500 rxns
EUR 189

One.Direct.Step RT-qPCR Kit for Probes (DIRECT PCR FROM BLOOD)

105-540 20 rcs x 50 µl
EUR 164

Leave a Comment

Your email address will not be published.